Центр коллективного пользования
Публикации
А.С. Кузнецова, К.Ф. Тирронен, Д.В. Панченко, Дж. Шрегель, Е.А. Хижкин.
Оценка эффективности методических приемов сбора и консервации неинвазивных проб при проведении популяционно-генетических исследований бурого медведя (Ursus arctos L.)
Ключевые слова: бурый медведь; Ursus arctos; экскременты; неинвазивный сбор; метод; консервация; питание
Показана возможность применения неинвазивного биологического материала в популяционно-генетических исследованиях крупных хищных млекопитающих на примере бурого медведя Кольско-Карельского региона. Сделана оценка эффективности методических приемов сбора и консервации проб. Материалом для исследования послужили 393 пробы экскрементов медведей, собранные на юге Мурманской области (Терский район) и в Республике Карелия. В лаборатории NIBIO Сванховд (Сванвик, Норвегия) выполнено выделение ДНК из образцов и проведено генетическое типирование по 8 микросателлитным локусам, в ходе которого были установлены генотипы 48 особей бурого медведя. Изучено влияние ряда факторов (способ консервации биологического материала, «свежесть» собранной пробы, композиция пищевых остатков и экспозиция биоматериала по отношению к солнечному свету) на сохранность ДНК в пробах и успешность получения генетического профиля особи. При совместной оценке изучаемых факторов достоверно значимое влияние на успешность амплификации имел состав пищевых остатков в пробе (р < 0,05). Установлено, что наличие ягод в экскрементах положительно влияет на консервацию молекулы ДНК и повышает результативность амплификации. Анализ каждого фактора независимо от остальных показал, что и «свежесть» собранной пробы и метод ее консервации достоверно влияют на успешность амплификации и генотипирования. Наиболее пригодными для генетического анализа оказались пробы экскрементов, собранные в кратчайшие сроки после дефекации (свежие) и хранившиеся в солевом стабилизирующем растворе (Qiagen QIAamp DNA stool kit). В результате исследования составлены рекомендации по использованию экскрементов животных в профильных генетических исследованиях.
Индексируется в РИНЦ
Последние изменения: 1 июля 2019